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[size=2]本人3’端已经测出来了,现在做5‘端,却怎么也扩不出来。5'RACE做了两轮pcr,用的都是以下程序:即1、94度2分钟。2、94度30秒,72度3分钟,5cycle。3、94度 30秒,70度30秒,72度3min,5
2015年08月05日发布人:月牙牙
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,1min可以不?我的5'end预计不会超过1K。
2、是否怀疑模板的问题?用的oligodG接头。有听说做单引物不用接头效果也很好,下次想试试。
3、稀释度或者稀释操作出问题?
4、还是不用touchdown,做一做Tm梯度跑跑引物来做
2014年09月24日发布人:04906
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[/color][/size],[size=4]我刚做过5’、3‘ RACE,我个人的经验如下:
1、首先,提的RNA必须完整,最好跑个RNA电泳来验证一下;
2、设计引物时要注意:Tm最好大于70度,两引物间要有100-200bp的重叠区
2011年09月27日发布人:幽兰君
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买了一家公司的二抗,说明书上也没有说明不可以用牛奶稀释。我就用常规的方法5%牛奶稀释。可是怎么都出不来结果。起先还以为是ECL有问题。后来直接点了二抗压片,发现只要加了牛奶就
2014年04月10日发布人:ha111
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人说不用,有人说用。不过实验室过去好像灭菌了。不过查不到是如何灭菌的。哪位高人传授一下啊。对了,我是要冻存细胞用。所以得保证无菌 ... [/quote]
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方法一:先把血清和二甲基亚砜以9:1的体积比混合,然后用标明二甲基亚砜专用的0.22微米的商业化一次性滤膜过滤,一张2.5cm的膜大约能滤50ml,
2012年05月29日发布人:mickeylin
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请教二甲基硅油的挥发性问题.
1, 二甲基硅油的室温挥发性?是否挥发?常温低压是否可能挥发?
2,二甲基硅油可能挥发的大约范围?,室温基本不挥发的,室温不挥发 可在50~180o度温度内长期使用,不挥发,180度以下都很难挥发
2014年06月08日发布人:adg
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Rtx-5ms柱与HP-5柱的区别!
还请赐教!,两者极性相似的……
Rtx-5MS的固定相是交联、键合的5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷,热稳定性可达360℃。但是其合成与键合工艺比标准含5%苯基的聚合物有更一步的改进。使其流失性
2009年10月02日发布人:TTEWEE
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[size=2]大家好,我最近用气相色谱做乙醇和N,N-二甲基甲酰胺残留溶剂分析的时候遇到了点问题,想向大家请教一下!问题如下:
图一是乙醇的定位峰,主要是乙醇和作为溶剂使用的二甲基亚砜 图中乙醇峰保留
2015年06月25日发布人:vvmmoy
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。
2.什么样的实验数据才是可靠的呢?
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1.多重PCR与单一PCR仅仅是引物探针设计上的差别吗?
2.选择绝对定量还是相对定量?
3.如何判断体系的阴性对照是否有污染?
4.溶解温度曲线是如何制作的
2011年10月16日发布人:潇湘子
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各位大侠有用普析PF5-2的原子荧光吗,我单位正准备购买这个仪器,有使用经验的话请帮忙指导一下,仪器的灵敏度、准确度等。。。。。,不是普析的用户,帮不上忙,应该有不少用户吧,希望大家积极伸出援助之手。,普析的AFS现在出新产品了,好像是
2014年07月27日发布人:艰苦奋斗